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分享猴elisa检测试剂盒的检测目的和操作步骤

发布时间:2022-07-27   点击次数:641次
  猴elisa检测试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法,由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检。
 
  猴elisa检测试剂盒的特点:
  1、准确度:通过添加回收实验进行评价;
  2、安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性;
  3、精密度:ELISA试剂一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围;
  4、经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理;
  5、简便性:指在不影响试剂的前三项指标的前提下,实验和测定步骤越少越好,在定性实验中结果判断简单明了,定量试验结果计算也应简单;
  6、特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
 
  猴elisa检测试剂盒的检测目的:
  用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
 
  操作步骤:
  1、标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
  2、加样:分别设空白孔、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀;
  3、加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外;
  4、温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟;
  5、配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用;
  6、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干;
  7、显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟;
  8、终止:每孔加终止液50μl,终止反应;
  9、测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。